Excessieve of incomplete tegenkleuring kan de juiste interpretatie van de resultaten
compromitteren.
De klinische interpretatie van kleuring of de afwezigheid daarvan, moet worden aangevuld met
morfologische studies die gebruik maken van de juiste controles, en ze moeten door een
gediplomeerde patholoog worden geëvalueerd in de context van de klinische geschiedenis van
de patiënt en andere diagnostische testen.
Weefsels van personen die besmet zijn met het hepatitis-B virus en waarin hepatitis-B
oppervlakte-antigeen (HbsAg) zit, kunnen niet-specifieke kleuring vertonen met mierikswortel
peroxidase
Onverwachte negatieve reacties in slecht gedifferentieerde neoplasma's kan te wijten zijn aan
verlies of gemarkeerde afname van expressie van antigeen, of verlies of mutatie(s) in de
gen(en)codering voor het antigeen. Onverwachte positieve kleuring in tumoren kan komen
door de expressie van een antigeen die normaal niet tot expressie komt in morfologisch
vergelijkbare normale cellen, of door de persistentie of acquisitie van een antigeen in een
neoplasma dat morfologische en immunohistochemische kenmerken ontwikkelt met andere
cellijnen (afwijkende differentiatie). Histopathologische classificatie van tumoren is geen exacte
wetenschap en literatuur waarin melding wordt gedaan van onverwachte kleuring, kan
controversieel zijn.
Reagentia kunnen onverwachte reacties vertonen in nog niet eerder geteste weefsels. De
mogelijkheid op onverwachte reacties zelfs in geteste weefselgroepen, kan niet helemaal
worden uitgesloten vanwege biologische veranderlijkheid van antigeenexpressie/target
nucleïnezuur in neoplasma's, of ander pathologisch weefsel. Neem contact op met uw
plaatselijke distributeur of het regionale kantoor van Leica Biosystems om onverwachte
reacties te melden.
IHC
Normale of non-immune serums uit dezelfde dierlijke bron als secondaire antiserums gebruikt
in blokkeringsstappen kunnen valse negatieve of valse positieve resultaten veroorzaken
vanwege auto-antilichamen of natuurlijke antilichamen.
IHC
Valse positieve resultaten in IHC kunnen zich voordoen vanwege non-immunologische
verbindingen van proteïnen of substraat reactie producten. Ze kunnen ook veroorzaakt worden
door pseudoperoxidase-activiteit (erythrocyten) endogene peroxidase-activiteit (cytochroom C)
of endogene biotine (bijvoorbeeld lever, borst, hersen, nier) afhankelijk van het type gebruikte
immunokleuring
IHC
Valse negatieve resultaten in IHC kunnen worden veroorzaakt door verschillende factoren,
inclusief echte antigeen-afname, verlies of structurele verandering tijdens „dedifferentiatie" van
de tumor, of artefactuele verandering tijdens fixatie of verwerking. Net als bij een
immunohistochemische test, betekent een negatief resultaat dat het antigeen niet werd
gedetecteerd, maar niet dat het antigeen afwezig was in het geteste weefsel.
ISH
Valse positieve resultaten in ISH kan zich voordoen door kruisreactiviteit van de probe met
andere nuceleïnezuursequenties evenals niet-specifieke verbinding van probe of
detectiereagentia met weefsel of weefselcomponenten
reagenscontroles kunnen worden opgenomen in de testen om te helpen bij het identificeren
van valse positieve kleuring.
ISH
DNA en RNA zijn gevoelig voor degradatie door nuclease activiteit
om de positieve controleprobe te testen met patiëntweefsel parallel aan specifieke probe en
patiëntweefsel om degradatie van nucleïnezuur te detecteren. De keuze van fixatiemiddel heeft
invloed op conservering van nucleïnezuren; daarom wordt weefsel gefixeerd in 10% neutraal
gebufferde formaline aanbevolen
negatief resultaat dat het nucleïnezuur niet werd gedetecteerd, maar niet dat het nucleïnezuur
afwezig was in het geteste weefsel.
BOND 6.0 gebruikshandleiding (NIET VS en China) rev. A05 © Leica Biosystems Melbourne Pty Ltd 2021
.
19
.
16
19
. Negatieve weefsel- en
18
. Net als met elke in-situ hybridisatietesten, betekent een
BOND reagentia gebruiken
. Daarom is het belangrijk
8,19
303