Advertenties
8
Voor voorkleuringsprotocollen moeten temperaturen in verwarmde stappen binnen het bereik
zijn van de volgende tabel:
Bakken en deparaffineren, bakstap
Warmte-voorbehandeling
Enzym-voorbehandeling
Denaturatie
Hybridisatie
9
Incubatietijden, die moeten worden ingesteld in minuten en seconden (mm:ss), moeten
binnen de bereiken vallen in de volgende tabel. De bereiken worden niet afgedwongen:
Bakken en deparaffineren, bakstap
Warmte-voorbehandeling
(omgevingstemperatuur)
Warmte-voorbehandeling (verwarmde stappen) 5–60
Enzym-voorbehandeling (stap 1)
Enzym-voorbehandeling (enzymstappen)
Denaturatie
Hybridisatie
Kleuringsprotocollen, reagensstappen
Kleuringsprotocollen, wasstappen
Over het algemeen adviseert Leica Biosystems voor reagensapplicatiestappen incubatietijden
die niet langer zijn dan 30 minuten. Als meer tijd nodig is, dupliceer dan stappen om dezelfde
reagens af te geven (Zie
10 Elke stap moet volledig gedefinieerd zijn met reagens, incubatietijd en (indien van toepassing)
temperatuur.
11 Enkele-kleurings- en sequentiële dubbelkleuringsprotocollen kunnen alleen gemengde reagens
hebben (d.w.z. gemengd DAB) per protocol, gebruikt in maximaal twee stappen in het
protocol. (Dus een sequentiële dubbelkleuringsprotocol kan twee gemengde reagentia hebben
- één in elk protocol - in totaal vier applicatiestappen - twee in elk protocol.)
Parallelle dubbelkleuringsprotocollen kunnen twee gemengde reagentia bevatten en elk
gemengd reagens kan tot twee keer worden toegepast in het protocol.
12 Alle componenten die nodig zijn om de gemengde reagens/reagentia in de kleuringsprotocollen
samen te stellen, moeten uit de voorkeursset van het protocol komen.
BOND 6.0 gebruikshandleiding (NIET VS en China) rev. A05 © Leica Biosystems Melbourne Pty Ltd 2021
Protocolstap
Protocolstap
7.4.2.2 Gedupliceerde
Protocollen (op de BOND-controller)
Temperatuurbereik (°C)
35–72
35–100
35–100
70–100
37–65
Incubatie bereik (minuten)
0–60
0–15
0
0–15
5–20
20–950
0–60
0–55
reagensstappen).
162
Advertenties
