14.1.1.3 BOND Streptavidine-Biotine Detectie (DAB)
Er is één detectiesysteem in deze categorie: BOND Intense R Detection.
Dit op DAB gebaseerde detectiesysteem werkt als volgt:
1.
Incubatie met hydrogeen peroxide om endogeen peroxidase-activiteit uit te doven.
2.
Applicatie van specifiek primair antilichaam.
3.
Het antilichaam wordt gelokaliseerd door een door de gebruiker geleverde formule van
secondair antilichaam geconjugeerd met biotine, dat zijn primaire antilichaam herkent.
4.
Toevoeging van een streptavidine-enzym conjugaat dat zich verbindt met de biotine dat
aanwezig is op het secondaire antilichaam.
5.
Visualisatie van het complex met een substraat chromogeen (3,3'-diaminobenzidine, of DAB)
waarvan het enzymproduct een bruine neerslag is.
6.
Hematoxyline tegenkleuring maakt de detectie van celkernen mogelijk.
Bij elke stap incubeert het BOND-systeem de coupes voor een exacte tijdsduur, en wast de coupes
daarna om ongebonden materiaal te verwijderen. Resultaten worden geïnterpreteerd met behulp
van een optisch-lichtmicroscoop, en helpen bij de differentiële diagnose van pathologische
processen die al dan niet worden geassocieerd met een bepaald antigeen.
14.1.2
Theranostische systemen
Vanwege het heterogene karakter van kanker en de instabiliteit van de genomen inherent aan
kankercellen, is de reactie van de patiënt op brede kankeragenten vaak suboptimaal. Deze agenten
hebben vaak ernstige bijwerkingen die de kwaliteit van het leven van de patiënt verminderen en
het risico hebben dat de patiënt bijwerkingen krijgt op geneesmiddelen. Daarentegen richten veel
opkomende kankertherapieën zich op specifieke biomerkers. De opkomst van deze bedoelde
therapieën heeft een belangrijke invloed gehad op pathologische diagnostische testen. Deze
speciale klasse diagnostische testen wordt ‚theranostiek' genoemd, waarbij de testen helpen bij het
identificeren van patiënten die hoogstwaarschijnlijk kunnen profiteren van specifieke therapieën:
Theranostiek = therapie + diagnose
Elk apparaat is een compleet systeem dat de aanwezigheid van een bedoelde proteïne of gen kan
vaststellen en daarmee de geschiktheid van behandeling met de bedoelde therapie. Leica
theranostische analyses worden geleverd als een totaal, geoptimaliseerd systeem met kant-en-klare
antilichamen of probes, detectiereagentia, controlereagentia en in sommige gevallen
controleglaasjes voor complete kwaliteitsgarantie op het diagnostische resultaat. De apparaten zijn
gebaseerd op ofwel IHC-, ofwel ISH-methodologie en zijn erkend door de toepasselijke regionale
regelgevingsinstanties voor gebruik bij het identificeren van patiënten voor wie de therapie wordt
overwogen.
U vindt de volledige instructies voor gebruik bij elk theranostische systeem. Met behulp van deze
instructies kunt u theranostische runs opzetten. Vanwege het karakter van theranostische testen is
het van het uiterste belang dat u deze instructies zo exact mogelijk opvolgt, zodat de analyse niet
ongeldig wordt.
BOND 6.0 gebruikshandleiding (NIET VS en China) rev. A05 © Leica Biosystems Melbourne Pty Ltd 2021
BOND reagentia gebruiken
293