14.2.1.2 Materialen voor IHC
IHC In aanvulling op de materialen die hierboven staan opgenoemd, is het volgende nodig voor IHC-
testen:
Negatieve controlereagens specifiek voor primaire antilichamen (Zie
BOND Oplossing 1 voor epitoopherstel
BOND Oplossing 2 voor epitoopherstel
BOND kant-en-klare primaire antilichamen of primaire antilichamen verdund in BOND primaire
antilichaamverdunningsmiddel in BOND open containers, 7 ml of 30 ml
Inbeddingsoplossing, op hars- of waterbasis
Titratiekit, optioneel (Zie
14.2.1.3 Materialen voor ISH
ISH In aanvulling op de materialen die hierboven staan opgenoemd, is het volgende nodig voor ISH-
testen:
ISH probes
Anti-fluoresceine antilichaam
Positieve en negatieve controleprobes specifiek voor ISH (Zie
14.2.1.4 Titratiekit
IHC BOND titratiekit bestaat uit 10 lege containers en 50 inserts (6 ml), en wordt gebruikt bij het
optimaliseren van de concentratie antilichamen voor het BOND-systeem. U kunt kleine volumes van
elk primaire antilichaamconcentraat voorbereiden en in de inserts plaatsen. Elke container kan
worden gebruikt voor in totaal 40 ml reagens.
Titratie van geconcentreerde antilichamen kan worden verkregen door seriële tweevoudige
verdunningen te gebruiken. De volgende methode beschrijft hoe u seriële verdunningen kunt
voorbereiden voor een enkele afgifte van 150 µL. Er blijft nog wat verdund antilichaam over in elke
titratiecontainerinsert. Het BOND-systeem heeft dit volume afgemeten en indien nodig, kan het
gebruikt worden voor andere optimalisatieprotocollen.
1.
Label drie inserts met geschikte verdunningen voor elk antilichaam.
2.
Maak een beginverdunning klaar in de eerste insert van 1 ml.
3.
Verdeel 500 µL van BOND Primair antilichaamverdunningsmiddel in insert 2 en 3.
4.
Vanuit de beginverdunning zet u 500 µL over naar insert 2 en vermengt u dit voorzichtig.
5.
Vanuit insert 2 zet u 500 µL over naar insert 3 en vermengt u dit voorzichtig.
BOND 6.0 gebruikshandleiding (NIET VS en China) rev. A05 © Leica Biosystems Melbourne Pty Ltd 2021
14.2.1.4
Titratiekit)
BOND reagentia gebruiken
14.3
Kwaliteitscontrole)
14.3
Kwaliteitscontrole)
295