Advertenties
6.9.1
Protocolcompatibiliteit
Kleurings- en voorbereidingsprotocollen hebben strenge compatibiliteitsvoorwaarden, terwijl voor
voorbehandelende hitte- en enzymprotocollen en ISH-hybridisatie- en denatureringsprotocollen
enige ruimte is voor variatie. Compatibiliteit voor deze protocollen is afhankelijk van het type
verwerkingsmodule (BOND-III of BOND-MAX), aantal en duur van de protocolstappen en statussen
van het apparaat tijdens de stappen. De protocollen zijn compatibel wanneer deze factoren
allemaal gelijk zijn of afwijken op manieren die kunnen worden aangepast zonder de
kleuringskwaliteit aan te tasten.
Compatibiliteitsregels voor alle types protocollen staan hieronder.
6.9.1.1
Kleuringsprotocol
Voor elk glaasje moet hetzelfde kleuringsprotocol gebruikt worden. Voor sequentiële
dubbelkleuringen moeten twee dezelfde kleuringsprotocollen gebruikt worden, in dezelfde volgorde.
IHC- en ISH-glaasjes kunnen niet door elkaar verwerkt worden in een enkele-kleuringsronde, maar
ze kunnen worden gecombineerd in sequentiële dubbelkleuringsrondes.
6.9.1.2
Voorbereidingsprotocollen
Protocollen voor „deparaffineren" en „bakken en deparaffineren"
1.
Hetzelfde protocol moet worden gebruikt voor alle glaasjes in het rek; en
2.
Glaasjes met voorbereidingsprotocol kunnen niet worden vermengd met glaasjes zonder een
voorbereidingsprotocol.
6.9.1.3
Voorbehandelingsprotocollen
Glaasjes met uitsluitend warmteterugwinning, uitsluitend enzymterugwinning, hitte-
enzymterugwinning, en helemaal geen epitoopherwinning, kunnen allemaal samen gebruikt
worden. Glaasjes die niet de huidige voorbehandeling ondergaan, worden gehydrateerd terwijl het
protocol voor de andere glaasjes loopt (hitte-geïnduceerde herwinning gaat altijd voor enzym-
geïnduceerde herwinning).
Op dezelfde manier zijn alle combinaties van glaasjes met en zonder ISH-denaturisering en
hybridisatie compatibel.
De delen hieronder geven voorwaarden voor compatibiliteit van voorbehandelingsprotocollen met
protocollen van hetzelfde type voorbehandeling.
Hitte-voorbehandeling
1.
Hitte-voorbehandelingsprotocollen zijn compatibel wanneer ze:
(i) hetzelfde aantal stappen hebben; en
(ii) voor elke stap dezelfde incubatietijden hebben, behalve voor de verhitte stappen.
Betreffende de gelijktijdige hittestappen, wordt de langste duur die is ingesteld voor de
stap gebruikt voor alle glaasjes. Glaasjes met kortere duur worden alleen verhit voor de
duur die daarvoor is geconfigureerd, waarna de stroom naar de glaasjesverhitter wordt
uitgeschakeld.
2.
Protocollen die epitoopherwinningsoplossing 1 en 2 kunnen door elkaar worden gebruikt.
3.
Glaasjes die hitte-voorbehandeling gebruiken, kunnen worden gedraaid in rekken met glaasjes
die niet een hitte-voorbehandeling gebruiken - de glaasjes die geen hitte-voorbehandeling
BOND 6.0 gebruikshandleiding (NIET VS en China) rev. A05 © Leica Biosystems Melbourne Pty Ltd 2021
Slide setup (Instelling glaasje) (op de BOND-controller)
en
147
Advertenties
