Als een hogere intensiteit nodig is, zijn de volgende opties beschikbaar voor alle BOND polymeer
detectiesystemen:
(i) Verhoog incubatietijd voor primair antilichaam of probe en/of bestanddelen van
detectiesystemen.
(ii) Gebruik een BOND DAB Enhancer stap. Let op dat alleen een enhancer het niveau van de
kleuringsintensiteit niet in dezelfde mate zal verhogen als die geproduceerd door het
Intense R detectiesysteem.
(iii) Alleen voor IHC, verhoog de concentratie primair antilichaam.
14.1.1.2 BOND Polymer Refine Red Detection
Er is één red detectiesyteem beschikbaar: BOND Polymer Refine Red Detection™. Het heeft
dezelfde voordelen als het hierboven beschreven, op DAB gebaseerde polymeer detectiesysteem,
maar in plaats van DAB wordt Fast Red chromogeen gebruikt voor visualisatie. Het systeem is
geschikt voor gebruik op weefsels zoals huid, waarbij weefselpigmenten kunnen worden aangezien
voor DAB.
Het BOND Polymer Refine Red Detection systeem is een hoogintensief Compact Polymer™ systeem
geconjugeerd met alkaline fosfatase dat heldere fuchsiarode immunokleuring geeft, evenals
hematoxyline tegenkleuring (inclusief blauwsel).
Fast Red chromogeen is chemisch instabiel onder normale laboratoriumomstandigheden. Houd u
dus strikt aan de gebruiksinstructies voor BOND Polymer Refine Red Detection zodat het
chromogeen efficiënt blijft. Leg altijd controleweefsel op hetzelfde glaasje als patiëntweefsel zodat
u meteen kunt zien als het systeem niet goed meer werkt.
Leica CV Ultra Mounting Media wordt aanbevolen voor gebruik met BOND Polymer Refine Red
Detection systeem. Het kan zijn dat andere inbedmiddelen de intensiteit van de kleuring zoals die
eerst verkregen is, niet kan vasthouden.
De stappen voor het BOND Polymer Refine Red Detection syteem zijn:
1.
Applicatie van specifiek primair antilichaam.
2.
Incubatie met een post-primair reagens.
3.
Incubatie met de polymeer reagens, dat een conjugaat bevat van polymeer alkaline fosfatase
(AP) en tertiair antilichaam.
4.
Visualisatie van het complex met substraat chromogeen, Fast Red, via een red precipitatie.
5.
Hematoxyline tegenkleuring maakt de detectie van celkernen mogelijk.
Incubatie, wassen en interpretatie van resultaten worden uitgevoerd zoals beschreven voor BOND
Labeled Streptavidin-Biotin Detection systemen.
BOND 6.0 gebruikshandleiding (NIET VS en China) rev. A05 © Leica Biosystems Melbourne Pty Ltd 2021
BOND reagentia gebruiken
292