Inhoudsopgave
Advertenties
7. Weefsel aangetast door formaline tijdens opheldering of waxinfiltratie
Dit probleem kan voorkomen als er door een lekkende klep formaline in het waxbad stroomt. Indien dit
probleem zich voordoet, moet u contact opnemen met de klantenservice om het instrument te laten testen.
Formalinecontaminatie kenmerkt zich door een blauwe tint in de kernen, verlies van chromatinedetails,
inkrimping van de kern, variabele eosinofielen en zwelling en/of krimping van het cytoplasma.
Smelt eerst de blokken, verwijder overtollige wax en plaats dan de monsters in nieuwe cassettes. Hierdoor
wordt contaminatie van de bewerkingsreagentia geminimaliseerd. Bewerk de blokken dan omgekeerd met
behulp van een van de methoden beschreven voor probleem 6. Week hierna in een Tris-HCl ophaaloplossing met
hoge pH (bv. BOND Epitope ophaaloplossing 2) gedurende 2–12 uur bij kamertemperatuur.
Deze behandeling bevordert de kwaliteit van de HE-kleuring, de snijkwaliteiten van het weefsel en de cohesie
van het preparaat. Het is onwaarschijnlijk dat de details van de kern, de toename van cytoplasmatisch volume
en de resolutie verbeteren.
8. Onvoldoende gefixeerd, onvoldoende bewerkt weefsel
Een mogelijke oplossing is het langzaam omgekeerd bewerken van het weefsel (zie C. Langzaam omkeerproces),
extra formalinefixatie toe te passen en dan opnieuw te bewerken met een schema dat geschikt is voor de omvang
en het soort monster (zie Monstertype en programmaduur op pagina 159).
Niet of slecht gefixeerd weefsel wordt beschadigd door bewerken. De alcohol en hoge temperaturen hebben een
fixerend effect dat anders is dan dat van formaldehyde. Hierdoor worden blokken sneller vatbaar voor verharding
en inkrimping. Indien gecombineerd met onvoldoende bewerking, kunnen blokken onbruikbaar worden.
Snel omkeerproces reinigingsprogramma
Stap Reagenstype
1
Reinigingsoplosmiddel
2
Reinigingsethanol
Bewerkingstijd:
Langzaam omkeerproces reinigingsprogramma
Stap Reagenstype
1
Reinigingsoplosmiddel
2
Reinigingsoplosmiddel
3
Reinigingsethanol
4
Reinigingsethanol
Bewerkingstijd:
HistoCore PELORIS 3 Gebruikershandleiding Rev A06
Tijd (min)
Temp. (°C)
12
65
6
55
18
Tijd (min)
Temp. (°C)
60
65
60
65
60
45
60
45
240
© Leica Biosystems Melbourne 2020
D/V
Roerder
Ambient
Hoog
Ambient
Hoog
D/V
Roerder
Ambient
Hoog
Ambient
Hoog
Ambient
Hoog
Ambient
Hoog
Troubleshooting
Uitlektijd (s)
10
10
Uitlektijd (s)
10
10
10
10
186
Advertenties
Inhoudsopgave
