Advertenties
14.2.2 Voorbereiding weefsel
Wij adviseren 15 tot 20 keer het volume aan weefsel aan 10% neutraal gebufferde formaline om weefsel te fixeren
voor immunohistochemische en in-situ hybridisatie kleuring met behulp van het BOND-systeem. Fixatie kan worden
uitgevoerd op kamertemperatuur (15–25 °C).
Voor HER2-testen leest u de aanbevelingen voor weefselvoorbereiding van de American Society of Clinical
Oncology/College of American Pathologists
Om het snijden van weefsel te vergemakkelijken en te voorkomen dat de messen van de microtoom beschadigd
raken, moet u benig weefsel voor de verwerking eerst ontkalken
De US Clinical Laboratory Improvement Act (CLIA) van 1988 bepaalt in 42 CFR 493.1259(b) dat „Het laboratorium
gekleurde glaasjes ten minste tien jaar moet bewaren vanaf de datum van onderzoek, en patiëntmateriaalblokken ten
minste twee jaar na de datum van onderzoek".
Snijd en neem 3 - 5 μm dikke coupes op positief geladen glaasjes (sommige specifieke weefseltypes vereisen
verschillende coupediktes). Om weefsel te drogen, legt u de goed uitgelekte glaasjes 10-30 minuten in een oven op
60°C (±5°C), of een nacht lang op 37°C. Glaasjes kunnen ook worden gebakken in de modules van BOND-III en
BOND-MAX. Glaasjes moeten goed aan de lucht worden gedroogd voordat u ze bakt. Raadpleeg referenties 13, 14 en
15 voor meer details over de voorbereiding van patiëntmateriaal.
Hang labels aan patiëntmateriaal en controleglaasjes zoals beschreven in
en epitoopherstel zijn volledig geautomatiseerd in het BOND-systeem.
14.2.3 Deparaffineren en bakken
In paraffine ingebedde weefselcoupes voor immunohistochemie moeten eerst worden vrijgemaakt van paraffine en
de coupe moet worden gerehydrateerd. De paraffine wordt verwijderd met behulp van BOND of BOND-PRIME Dewax
Solution en de secties worden gerehydrateerd. Het BOND-systeem bevat deparaffinageprotocollen die dit proces
automatisch uitvoeren.
Voorafgaand aan het deparaffineren kan de BOND-III- of BOND-MAX-module ook het weefsel bakken zodat hij beter
hecht aan het glaasje. De BOND Bak- en deparaffinageprotocollen automatiseren zowel de bak- als
deparaffinageprocessen.
Let op dat weefsel aan de lucht moet worden gedroogd om al het water te verwijderen voordat het in
een module wordt geplaatst voor bakken en deparaffineren.
BOND 7 handleiding, 49.7556.508 A06
Copyright © 2023 Leica Biosystems Melbourne Pty Ltd
10
, of raadpleegt u uw lokale richtlijnen en regelgeving.
11 ,12
.
13
Raadpleeg lokale regelgeving voor de eisen voor uw instituut.
14 BOND-reagentia gebruiken
4 Snelle
start. Deparaffineren, rehydrateren
333
Advertenties
