Advertenties
Een diagnostische „merker" is een reagens die wordt gebruikt om een specifiek antigeen of
DNA/RNA-verbinding te detecteren in een weefselmonster. De marker is het primaire antilichaam in
IHC, of de probe in ISH (zie hieronder).
In Situ Hybridisatie (ISH)
Moleculaire biologietechnieken hebben ons begrip van ziekte enorm vooruit geholpen. In-situ hybridisatie combineert
moleculaire biologie met histologie, waardoor DNA of RNA in hun cellulaire context zichtbaar worden. Sinds
nucleïnezuurdetectie voor het eerst werd geïntroduceerd in 1969
waardoor ze een steeds meer gewaardeerd middel zijn geworden voor klinische pathologie en research.
In-situ hybridisatie maakt gebruik van complementaire verbinding van nucleotide bases in DNA of RNA. Een gelabelde
nucleïnezuurprobe verbind zich specifiek aan zijn complementaire sequentie in gefixeerd weefsel- of celmonster. De
probe wordt zichtbaar gemaakt via het toedienen van een antilichaam tegen het label gevolgd door BOND-polymeer
detectiereagentia. Het BOND geautomatiseerde systeem en de reagentia bieden een betrouwbaar en efficiënt
alternatief voor de lastige handmatige techniek.
14.1.1 BOND-detectiesystemen
Leica Biosystems levert een reeks detectiesystemen die speciaal ontwikkeld zijn voor BOND. De belangrijkste
hieronder is het BOND Polymer Refine Detection™ systeem, dat hoge-intensiteitskleuring biedt met een scherpe
definitie zonder gebruik van streptavidine en biotine.
De beschikbare BOND-detectiesystemen staan in de delen hieronder.
14.1.1.1 BOND Polymer Refine Detection
l
14.1.1.2 BOND Polymer Refine Red Detection
l
14.1.1.1 BOND Polymer Refine Detection
De BOND-PRIME-module gebruikt een andere versie van dit detectiesysteem. Het wordt geleverd in
een dubbele reagenssysteemlade en de hematoxylinereagenscontainer is een afzonderlijk hulpitem.
Raadpleeg voor meer informatie de afzonderlijke BOND-PRIME-gebruikshandleiding.
Het BOND op DAB-gebaseerde polymeersysteem, BOND Polymer Refine Detection, levert hoogintensiteitskleuring
samen met scherpe aftekening van antilichaamverbinding met het targetantigeen of probeverbinding met het
nucleïnezuur. Het systeem maakt geen gebruik van streptavidine en biotine, waardoor niet-specifieke kleuring door
endogeen biotine is uitgesloten. Endogene biotine is overheersend in sommige weefsels zoals carcinoma uit het
gastro-intestinale stelsel, nier, lever en borst. BOND polymeer detectiesystemen hebben een hogere sensitiviteit dan
gelabelde streptavidine-biotine-systemen, wat resulteert in lagere concentratie van antilichamen en snellere
omlooptijden.
BOND 7 handleiding, 49.7556.508 A06
Copyright © 2023 Leica Biosystems Melbourne Pty Ltd
6
, zijn in-situ-hybridisatieprotocollen sterk verbeterd,
14 BOND-reagentia gebruiken
328
Advertenties
