Advertenties
6.9.1.1
Kleuringsprotocol
Voor elk glaasje moet hetzelfde kleuringsprotocol worden gebruikt. Voor sequentiële dubbelkleuringen moeten twee
dezelfde kleuringsprotocollen gebruikt worden, in dezelfde volgorde.
IHC- en ISH-glaasjes kunnen niet door elkaar verwerkt worden in een enkele kleuringsronde, maar ze kunnen worden
gecombineerd in sequentiële multiplexkleuringsrondes.
6.9.1.2
Voorbereidingsprotocollen
Protocollen voor „deparaffineren" en „bakken en deparaffineren"
Hetzelfde protocol moet worden gebruikt voor alle glaasjes in de houder; en
l
Glaasjes met voorbereidingsprotocol kunnen niet worden vermengd met glaasjes zonder een
l
voorbereidingsprotocol.
6.9.1.3
Voorbehandelingsprotocollen
Glaasjes met uitsluitend warmteterugwinning, uitsluitend enzymterugwinning, hitte- en enzymterugwinning, en
helemaal geen epitoopherwinning, kunnen allemaal samen gebruikt worden. Glaasjes die niet de huidige
voorbehandeling ondergaan, worden gehydrateerd terwijl het protocol voor de andere glaasjes loopt (hitte-
geïnduceerde herwinning gaat altijd voor enzym-geïnduceerde herwinning).
Op dezelfde manier zijn alle combinaties van glaasjes met en zonder ISH-denaturisering en hybridisatie compatibel.
De delen hieronder geven voorwaarden voor compatibiliteit van voorbehandelingsprotocollen met protocollen van
hetzelfde type voorbehandeling.
Hitte-voorbehandeling
Hitte-voorbehandelingsprotocollen zijn compatibel wanneer ze:
1
hetzelfde aantal stappen hebben; en
l
voor elke stap dezelfde incubatietijden hebben, behalve voor de verhitte stappen.
l
Betreffende de gelijktijdige hittestappen, wordt de langste duur die is ingesteld voor de stap gebruikt
voor alle glaasjes. Glaasjes met kortere duur worden alleen verhit voor de duur die daarvoor is
geconfigureerd, waarna de stroom naar de glaasjesverwarmer wordt uitgeschakeld.
Protocollen die epitoopherwinningsoplossing 1 en 2 kunnen door elkaar worden gebruikt.
2
Glaasjes die hitte-voorbehandeling gebruiken, kunnen worden gedraaid in houders met glaasjes die niet een
3
hitte-voorbehandeling gebruiken - de glaasjes die geen hitte-voorbehandeling gebruiken, worden gehydrateerd
met epitoophersteloplossing op omgevingstemperatuur terwijl de andere glaasjes worden verwerkt.
BOND 7 handleiding, 49.7556.508 A06
Copyright © 2023 Leica Biosystems Melbourne Pty Ltd
6 Slide setup (Instelling glaasje) (op de BOND-controller)
164
Advertenties
