Advertenties
Onverwachte negatieve reacties in slecht gedifferentieerde neoplasma's kan te wijten zijn aan verlies of
l
gemarkeerde afname van expressie van antigeen, of verlies of mutatie(s) in de gen(en)codering voor het
antigeen. Onverwachte positieve kleuring in tumoren kan komen door de expressie van een antigeen die
normaal niet tot expressie komt in morfologisch vergelijkbare normale cellen, of door de persistentie of
acquisitie van een antigeen in een neoplasma dat morfologische en immunohistochemische kenmerken
ontwikkelt met andere cellijnen (afwijkende differentiatie). Histopathologische classificatie van tumoren is
geen exacte wetenschap en literatuur waarin melding wordt gedaan van onverwachte kleuring, kan
controversieel zijn.
Reagentia kunnen onverwachte reacties vertonen in nog niet eerder geteste weefsels. De mogelijkheid op
l
onverwachte reacties zelfs in geteste weefselgroepen, kan niet helemaal worden uitgesloten vanwege
biologische veranderlijkheid van antigeenexpressie/target nucleïnezuur in neoplasma's, of ander pathologisch
weefsel. Neem contact op met uw plaatselijke distributeur of het regionale kantoor van Leica Biosystems om
onverwachte reacties te melden.
IHC
Normale of non-immune serums uit dezelfde dierlijke bron als secondaire antiserums gebruikt in
l
blokkeringsstappen kunnen valse negatieve of valse positieve resultaten veroorzaken vanwege auto-
antilichamen of natuurlijke antilichamen.
Valse positieve resultaten in IHC kunnen zich voordoen vanwege non-immunologische verbindingen van
l
proteïnen of substraat reactie producten. Ze kunnen ook veroorzaakt worden door pseudoperoxidase-activiteit
(erythrocyten) endogene peroxidase-activiteit (cytochroom C) of endogene biotine (bijvoorbeeld lever, borst,
hersen, nier) afhankelijk van het type gebruikte immunokleuring
Valse negatieve casussen in IHC kunnen worden veroorzaakt door verschillende factoren, inclusief echte
l
antigeen-afname, verlies of structurele verandering tijdens „dedifferentiatie" van de tumor, of artefactuele
verandering tijdens fixatie of verwerking. Net als bij een immunohistochemische test, betekent een negatief
resultaat dat het antigeen niet werd gedetecteerd, maar niet dat het antigeen afwezig was in het geteste
weefsel.
ISH
Valse positieve resultaten in ISH kan zich voordoen door kruisreactiviteit van de probe met andere
l
nuceleïnezuursequenties evenals niet-specifieke verbinding van probe of detectiereagentia met weefsel of
weefselcomponenten
te helpen bij het identificeren van valse positieve kleuring.
DNA en RNA zijn gevoelig voor degradatie door nuclease activiteit
l
positieve controleprobe te testen met patiëntweefsel parallel aan specifieke probe en patiëntweefsel om
degradatie van nucleïnezuur te detecteren. De keuze van fixatiemiddel heeft invloed op conservering van
nucleïnezuren; daarom wordt weefsel gefixeerd in 10% neutraal gebufferde formaline aanbevolen
met elke in-situ hybridisatietesten, betekent een negatief resultaat dat het nucleïnezuur niet werd
gedetecteerd, maar niet dat het nucleïnezuur afwezig was in het geteste weefsel.
BOND 7 handleiding, 49.7556.508 A06
Copyright © 2023 Leica Biosystems Melbourne Pty Ltd
18
. Negatieve weefsel- en reagenscontroles kunnen worden opgenomen in de testen om
16
.
8 ,19
. Daarom is het belangrijk om de
14 BOND-reagentia gebruiken
19
. Net als
341
Advertenties
