Inhoudsopgave
Advertenties
Achtergebleven verontreinigingen verwijderen
Nucleïnezuren blijven gebonden aan het membraan, terwijl verontreinigingen doeltreffend
worden weggespoeld tijdens 3 wasstappen.
Elutie van virale nucleïnezuren
Vervolgens worden hoogzuiver viraal RNA en DNA in één stap geëlueerd uit het membraan
van de QIAamp MinElute-kolom in elutiebuffer (AVE) en op kamertemperatuur gebracht. De
QIAamp MinElute-kolommen zijn geschikt voor minimale elutievolumes van slechts 20 µl voor
de handmatige procedure en 60 µl voor de geautomatiseerde procedure. Een laag
elutievolume leidt tot sterk geconcentreerd nucleïnezuureluaat.
Bij vervolgbepalingen waarvoor een klein uitgangsvolume nodig is (zoals sommige PCR- en
RT-PCR-assays), kan een sterker geconcentreerd eluaat de gevoeligheid van het assay
verhogen.
Bij vervolgbepalingen waarvoor een groter uitgangsvolume nodig is, kan het elutievolume
worden vergroot tot 150 µl voor de handmatige procedure en tot 100 µl voor de
geautomatiseerde procedure. Een eluaat met een groter volume bevat echter een lagere
concentratie nucleïnezuren.
Vanwege de resterende elutiebuffer die na centrifugeren door het membraan van de spinkolom
wordt vastgehouden, kan het verkregen volume van het eluaat lager zijn dan het volume van
de elutiebuffer dat op de kolom wordt aangebracht. Bovendien is het volume aan eluaat dat
wordt verkregen, afhankelijk van de aard van het monster.
Geëlueerde nucleïnezuren worden verzameld in elutiebuisjes van 1,5 ml(ET, meegeleverd) en
kunnen maximaal 24 uur worden opgeslagen bij 2-8 °C. Voor langdurige opslag van meer
dan 24 uur adviseren wij om gezuiverde nucleïnezuren bij -20 °C te bewaren.
6
Gebruiksaanwijzing (Handleiding) QIAamp DSP Virus Spin Kit
06/2022
Advertenties
Inhoudsopgave
