Beschrijving en principe
De procedure van de QIAamp DSP Virus Spin Kit bestaat uit 4 stappen (lyseren, binden,
wassen en elueren) en wordt uitgevoerd met behulp van QIAamp MinElute
-kolommen in een
®
standaard microcentrifuge of wordt geautomatiseerd uitgevoerd in de QIAcube Connect MDx.
De procedure is ontwikkeld om de kans op kruisbesmetting te minimaliseren en maakt veilige
hantering van mogelijk besmettelijke monsters mogelijk. Met behulp van de eenvoudige
QIAamp DSP Virus Spin-procedure kunnen meerdere monsters gelijktijdig worden verwerkt.
De QIAamp DSP Virus Spin Kit kan worden gebruikt voor het isoleren van viraal RNA en DNA
uit veel verschillende RNA- en DNA-virussen. De prestatiekenmerken zijn echter niet voor alle
virussoorten vastgesteld en moeten door de gebruiker worden gevalideerd.
Lyseren met QIAGEN Protease (QP)
De monsters worden bij verhoogde temperaturen gelyseerd onder zeer denaturerende
omstandigheden. Lysis wordt uitgevoerd in de aanwezigheid van QIAGEN Protease (QP) en
lysisbuffer (AL), die samen zorgen voor de inactivering van RNasen.
Adsorptie aan het QIAamp MinElute-membraan
De bindingscondities kunnen worden aangepast door het toevoegen van ethanol. Dit zorgt
voor een optimale binding van het virale RNA en DNA aan het membraan. Vervolgens worden
de lysaten aangebracht op een QIAamp MinElute-kolom en met behulp van centrifugeren door
het silicamembraan geperst, waardoor de virale nucleïnezuren worden geadsorbeerd.
Dankzij zout en pH-condities blijven proteïne en andere verontreinigingen die een remmende
invloed kunnen hebben op PCR en andere enzymatische vervolgbepalingen niet gebonden
aan het QIAamp MinElute-membraan.
De (meegeleverde) wasbuisjes van 2 ml hebben een ondersteunende functie voor de QIAamp
MinElute-kolom tijdens het laden en het wassen.
Gebruiksaanwijzing (Handleiding) QIAamp DSP Virus Spin Kit 06/2022
5