Lysisbuffer (AL) bevat interne controle. Aangezien lysisbuffer (AL) een hoge viscositeit
heeft, moet u ervoor zorgen dat u het juiste volume aan lysisbuffer (AL) toevoegt door
zorgvuldig te pipetteren.
Voeg QIAGEN Protease (QP) niet rechtstreeks toe aan lysisbuffer (AL).
4. Incubeer 15 minuten bij 56 °C in een verwarmblok.
5. Centrifugeer het lysisbuisje (LT) kortdurend om eventuele druppeltjes aan de onderkant van
de dop te verwijderen.
Opmerking: Indien handmatige lysis (stap 1–15) is uitgevoerd zonder instrument, kunnen
de volgende stappen (stap 6–15) worden geautomatiseerd: 'Protocol handmatige lysis' op
de QIAcube Connect MDx.
6. Voeg 250 µl ethanol (96–100%) toe aan het monster, sluit het deksel en meng de inhoud
grondig gedurende ≥15 seconden met een pulse-vortexmixer. Incubeer het lysaat
gedurende 5 minuten met de ethanol bij kamertemperatuur (15–25 °C).
7. Centrifugeer het buisje kort om eventuele druppeltjes aan de onderkant van de dop te
verwijderen.
8. Breng al het lysaat uit stap 7 voorzichtig aan op de QIAamp MinElute-kolom zonder de
rand te bevochtigen. Doe het dopje dicht en centrifugeer > 1 min. bij ongeveer 6000 x g.
Plaats de QIAamp MinElute-kolom in een schoon wasbuisje (WT) van 2 ml en gooi het
wasbuisje (WT) met het filtraat weg.
Centrifugeer het buisje nogmaals met een hogere snelheid totdat de QIAamp MinElute-
kolom leeg is als het lysaat de kolom niet volledig is gepasseerd.
9. Open de QIAamp MinElute-spinkolom voorzichtig en voeg 500 µl wasbuffer 1 (AW1) toe
zonder de rand te bevochtigen. Doe het dopje dicht en centrifugeer ≥ 1 min. bij ongeveer
6000 x g. Plaats de QIAamp MinElute-kolom in een schoon wasbuisje (WT) van 2 ml en
gooi het wasbuisje (WT) met het filtraat weg.
Gebruiksaanwijzing (Handleiding) QIAamp DSP Virus Spin Kit 06/2022
33