Samenvatting van Inhoud voor illumina NextSeq 550Dx
Pagina 1
Onderzoeksmodus NextSeq 550Dx Referentiegids van het instrument Documentnr.1000000041922 v03 NLD BEDRIJFSEIGENDOM VAN ILLUMINA Oktober 2021 Uitsluitend bedoeld voor onderzoeksdoeleinden. Niet voor gebruik in diagnostische procedures.
Pagina 2
Referentiegids onderzoeksmodus NextSeq 550Dx-instrument Dit document en de inhoud ervan zijn eigendom van Illumina, Inc. en haar dochterondernemingen ('Illumina'), en zijn alleen bedoeld voor contractueel gebruik door haar klanten in verband met het gebruik van de hierin beschreven producten en voor geen enkel ander doel. Dit document en de inhoud ervan mogen niet worden gebruikt of gedistribueerd voor welk ander doel dan ook en/of op een andere manier worden gecommuniceerd, geopenbaard of gereproduceerd zonder de voorafgaande schriftelijke toestemming van Illumina.
Pagina 3
Afbeelding in Een handmatige wassing uitvoeren bijgewerkt om nieuwe 1000000041922 v02 2020 reagenswascartridges en bufferwascartridges weer te geven. Statusbalkinformatie bijgewerkt met aanvullende kleuren. Documentnr. Maart 2018 Informatie over de Illumina Proactive-monitoringservice toegevoegd in 1000000041922 v01 het gedeelte Configure System Settings (Systeeminstellingen configureren). Documentnr. November Eerste uitgave.
Inhoudsopgave Hoofdstuk 1 Overzicht Toelichting op deze handleiding Inleiding Extra hulpmiddelen Instrumentonderdelen Overzicht reagenskit Overzicht verbruiksartikelen sequencing Hoofdstuk 2 Aan de slag Het instrument opstarten Systeeminstellingen aanpassen Door de gebruiker geleverde verbruiksartikelen en apparatuur Hoofdstuk 3 Sequencing Inleiding Workflow sequencing De reagenscartridge prepareren De stroomcel prepareren Bibliotheken voorbereiden voor sequencing...
Pagina 5
Referentiegids onderzoeksmodus NextSeq 550Dx-instrument Workflow-rehybridisatie BeadChip- en scanfouten Aangepaste recepten en receptmappen RAID-foutmelding Systeeminstellingen configureren Bijlage B Realtime analyse Overzicht Real-Time Analysis Workflow Real-Time Analysis Bijlage C Uitvoerbestanden en -mappen Sequencinguitvoerbestanden Structuur uitvoermap Uitvoerbestanden scannen Structuur van de uitvoermap voor scans Index Technische ondersteuning Documentnr.1000000041922 v03 NLD...
® Data Analysis (Gegevensanalyse) – gebruik de BlueFuse Multi-software om array-gegevens te analyseren. Extra hulpmiddelen Op de website van Illumina kan de volgende documentatie worden gedownload. Documentnr.1000000041922 v03 NLD Uitsluitend bedoeld voor onderzoeksdoeleinden. Niet voor gebruik in diagnostische procedures.
Illumina om toegang te krijgen tot documentatie, softwaredownloads, online training en veelgestelde vragen. Instrumentonderdelen Het NextSeq 550Dx-instrument heeft een monitor met touchscreen, een statusbalk en 4 compartimenten. Afbeelding 1 Instrumentonderdelen Documentnr.1000000041922 v03 NLD Uitsluitend bedoeld voor onderzoeksdoeleinden.
Reagens- en buffercompartimenten Het instellen van een sequencing-run op het NextSeq 550Dx-instrument vereist toegang tot het reagenscompartiment en het buffercompartiment om runverbruiksartikelen te laden en de bak voor gebruikte reagentia te legen.
NCS opnieuw wordt opgestart. Aan-uitknop De aan-uitknop aan de voorkant van de NextSeq 550Dx schakelt de voeding naar het instrument en de instrumentcomputer in. De aan-uitknop voert de volgende acties uit, afhankelijk van de status van de instrumentvoeding. De NextSeq 550Dx start standaard op in de diagnostische modus.
Raadpleeg voor meer informatie de bijsluiter van de NextSeq 550Dx High Output Reagent Kit v2 (300 cycli), NextSeq 550Dx High Output Reagent Kit v2.5 (300 cycli) of NextSeq 550Dx High Output Reagent Kit v2.5 (75 cycli).
Referentiegids onderzoeksmodus NextSeq 550Dx-instrument LET OP Voor NextSeq 550Dx High Output Reagent v2.5-kits is NOS 1.3 of later vereist, zodat het instrument de v2.5 stroomcelcartridge kan accepteren. Voltooi software-updates voordat u monsters en verbruiksartikelen voorbereidt om verspilling van reagentia en/of monsters te voorkomen.
Pagina 12
Behandel gebruikte reagentia als chemisch afval en voer deze af in overeenstemming met de geldende regionale, nationale en lokale wet- en regelgeving. Raadpleeg voor aanvullende informatie met betrekking tot milieu, gezondheid en veiligheid het veiligheidsinformatieblad op support.illumina.com/sds.html. Documentnr.1000000041922 v03 NLD Uitsluitend bedoeld voor onderzoeksdoeleinden.
Pagina 13
Referentiegids onderzoeksmodus NextSeq 550Dx-instrument Gereserveerde reservoirs Afbeelding 6 Genummerde reservoirs Positie Omschrijving 7, 8 en 9 Gereserveerd voor optionele aangepaste primers Bibliotheken laden Verwijderbaar reservoir in positie nr. 6 De voorgevulde reagenscartridge bevat een denaturatiereagens op positie 6 dat formamide bevat. Om het veilig verwijderen van eventueel ongebruikt reagens na de run mogelijk te maken, is het reservoir in positie 6 verwijderbaar.
Hoofdstuk 2 Aan de slag Het instrument opstarten Systeeminstellingen aanpassen Door de gebruiker geleverde verbruiksartikelen en apparatuur Het instrument opstarten Zet de aan-uitschakelaar op positie I (aan). Afbeelding 8 De aan-uitschakelaar op de achterkant van het instrument Druk op de aan-uitknop boven het reagenscompartiment. De aan-uitknop zet de voeding van het instrument aan en start de geïntegreerde instrumentcomputer en -software.
Referentiegids onderzoeksmodus NextSeq 550Dx-instrument Modusindicatoren instrument De standaardmodus van de NextSeq 550Dx is de diagnostische modus. Het volgende op het NCS- scherm geeft de modus van het instrument aan. Modus Startscherm Kleurenbalk Richting statuspictogram Diagnostische modus Welcome to NextSeqDx Blauw Horizontaal...
Referentiegids onderzoeksmodus NextSeq 550Dx-instrument Wanneer bepaalde fouten optreden Wanneer interactie van de gebruiker vereist is Wanneer een run is voltooid Selecteer Save (Opslaan) om instellingen op te slaan en advance (ga verder) naar het volgende scherm. Opties voor runinstallatie instellen Selecteer System Customization (Aanpassing systeem) vanuit het scherm Manage Instrument (Instrument beheren).
Algemene leverancier van Het instrument wassen (handmatig wassen) laboratoriumkwaliteit laboratoriumbenodigdheden Luchtfilter Illumina, catalogusnr. Reinigen van de lucht die het instrument binnenlaat voor 20022240 koeling Richtlijnen voor water van laboratoriumkwaliteit Gebruik altijd water van laboratoriumkwaliteit of gedestilleerd water om de instrumentprocedures uit te voeren.
Automatische wassing na de run Inleiding Om een sequencing-run op het NextSeq 550Dx-instrument uit te voeren, bereidt u een reagenscartridge en stroomcel voor, en volgt u vervolgens de aanwijzingen van de software om de run in te stellen en te starten.
Referentiegids onderzoeksmodus NextSeq 550Dx-instrument Workflow sequencing Maak de run aan in de Local Run Manager-softwaremodule. Zie de handleiding voor de analyseworkflow voor uw specifieke module. Prepareer een nieuwe reagenscartridge: ontdooien en inspecteren. Bereid een nieuwe stroomcel voor: op kamertemperatuur brengen, uitpakken en inspecteren. Denatureer en verdun bibliotheken.
Voor aanwijzingen over het voorbereiden van monsterbibliotheken voor sequencing, inclusief bibliotheekverdunning en pooling, raadpleegt u het gedeelte in de gebruiksaanwijzing voor de betreffende bibliotheekpreparatiekit. Optimalisatie van de clusterdichtheid op de NextSeq 550Dx is vereist. Bibliotheken denatureren en verdunnen Denatureer en verdun uw bibliotheken tot een laadvolume van 1,3 ml en een laadconcentratie van 1,8 pM.
Referentiegids onderzoeksmodus NextSeq 550Dx-instrument Laad 1,3 ml geprepareerde bibliotheken in reservoir nr. 10 met het label Load Library Here (Bibliotheek hier laden). Raak de folie niet aan bij het dispenseren van de bibliotheken. Afbeelding 10 Bibliotheken laden Een sequencing-run instellen Aanmelden bij BaseSpace Voer uw gebruikersnaam en wachtwoord voor BaseSpace in.
Referentiegids onderzoeksmodus NextSeq 550Dx-instrument Afbeelding 12 Verwijder de clamshellverpakking Reinig het glazen oppervlak van de stroomcel met een pluisvrij alcoholdoekje. Droog het glas af met een pluisarm labdoek. OPMERKING Zorg ervoor dat het glasoppervlak van de stroomcel schoon is. Herhaal indien nodig de reinigingsstap.
Pagina 23
Behandel gebruikte reagentia als chemisch afval en voer deze af in overeenstemming met de geldende regionale, nationale en lokale wet- en regelgeving. Raadpleeg voor aanvullende informatie met betrekking tot milieu, gezondheid en veiligheid het veiligheidsinformatieblad op support.illumina.com/sds.html. Schuif de lege bak voor gebruikte reagentia in het buffercompartiment totdat deze niet verder kan.
Raadpleeg voor aanvullende informatie met betrekking tot milieu, gezondheid en veiligheid het veiligheidsinformatieblad op support.illumina.com/sds.html. OPMERKING Om het veilig verwijderen van ongebruikte reagentia mogelijk te maken, is het reservoir in positie 6 verwijderbaar.
Referentiegids onderzoeksmodus NextSeq 550Dx-instrument Afbeelding 17 De reagenscartridge laden Selecteer Load (Laden). De software brengt de cartridge automatisch in positie (~30 seconden), de ID van de reagenscartridge wordt op het scherm weergegeven en de sensoren worden gecontroleerd. Selecteer Next (Volgende). Gebruikt reservoir uit positie 6 verwijderen Nadat u de gebruikte reagenscartridge uit het instrument hebt verwijderd, verwijdert u de rubberen bescherming over de gleuf naast positie nr.
Referentiegids onderzoeksmodus NextSeq 550Dx-instrument Beschikbare run selecteren (BaseSpace-configuratie) Selecteer een runnaam uit de lijst van beschikbare runs. Gebruik de pijlen omhoog en omlaag om de lijst door te bladeren of voer in het Search-veld (Zoeken) een runnaam in. Selecteer Next (Volgende). Bevestig de runparameters.
Referentiegids onderzoeksmodus NextSeq 550Dx-instrument [Optioneel] Selecteer de knop Advanced Settings (Geavanceerde instellingen) om de runparameters aan te passen. Selecteer een recept uit het vervolgkeuzemenu Recipe (Recept). Alleen compatibele recepten worden in de lijst vermeld. Locatie uitvoermap – wijzig de locatie van de uitvoermap voor de huidige run. Selecteer Browse (Bladeren) om naar een netwerklocatie te navigeren.
Universal Copy Service (Universele kopieerservice) De NextSeq 550Dx bevat een Universal Copy Service (Universele kopieerservice). RTA2 vraagt de service om bestanden te kopiëren vanaf een bronlocatie naar een doellocatie en de service verwerkt kopieerverzoeken in de volgorde waarin ze zijn ontvangen. Als er een uitzondering optreedt, wordt het bestand opnieuw in de rij geplaatst voor kopiëren op basis van het aantal bestanden in de rij voor...
Referentiegids onderzoeksmodus NextSeq 550Dx-instrument Sequencing Analysis Viewer De Sequencing Analysis Viewer-software toont meetgegevens voor de sequentiëring die tijdens de run zijn gegenereerd. Meetgegevens verschijnen in de vorm van diagrammen, grafieken en tabellen op basis van de gegevens die door RTA zijn gegenereerd en zijn weggeschreven naar InterOp-bestanden. Meetgegevens worden geüpdatet naargelang de run vordert.
De DMAP-map bevat informatie die de bead-locaties identificeert op de BeadChip en het met elke bead geassocieerde signaal kwantificeert. Een DMAP-map is uniek voor elke BeadChip-barcode. Met het hulpprogramma Bestanddecoderingsclient kunt u DMAP-mappen rechtstreeks van de Illumina- servers downloaden via het standaard HTTP-protocol.
Referentiegids onderzoeksmodus NextSeq 550Dx-instrument Clusterbestanden – clusterbestanden beschrijven de clusterposities voor de genotyperings-array van Illumina en worden bij het analyseren van gegevens gebruikt om het genotype te bepalen. Clusterbestanden gebruiken de *.egt-bestandsindeling. De locatie van de bestanden is gespecificeerd in het BeadChip-scanconfiguratiescherm. Selecteer Manage Instrument (Instrument beheren), System Configuration (Systeemconfiguratie) en dan BeadChip Scan Configuration (BeadChip-scanconfiguratie) vanuit het NCS-startscherm.
Referentiegids onderzoeksmodus NextSeq 550Dx-instrument Voer de vereiste informatie in. Navigeer naar de DMAP-map die u wilt downloaden. Zorg ervoor dat u voldoende beschikbare ruimte hebt op de downloadbestemming. Start de download. Bekijk de downloadstatus in het tabblad Download Status and Log (Downloadstatus en -log).
Behandel gebruikte reagentia als chemisch afval en voer deze af in overeenstemming met de geldende regionale, nationale en lokale wet- en regelgeving. Raadpleeg voor aanvullende informatie met betrekking tot milieu, gezondheid en veiligheid het veiligheidsinformatieblad op support.illumina.com/sds.html. Documentnr.1000000041922 v03 NLD Uitsluitend bedoeld voor onderzoeksdoeleinden.
Referentiegids onderzoeksmodus NextSeq 550Dx-instrument Verwijder de stroomcel uit het beeldvormingscompartiment. Sluit de deuren van het reagens- en buffercompartiment. De BeadChip-adapter laden Gebruik de uitlijnpennetjes om de BeadChip-adapter op het platform te positioneren. Afbeelding 22 De BeadChip-adapter laden Selecteer Load (Laden). Het klepje sluit automatisch, de BeadChip-ID verschijnt op het scherm en de sensoren worden gecontroleerd.
Referentiegids onderzoeksmodus NextSeq 550Dx-instrument Rood – De controle is niet geslaagd. Voor alle items die niet slagen, is een actie vereist voordat u verder kunt gaan. Zie Fouten bij automatische controle oplossen op pagina 42. Om een lopende automatische pre-runcontrole te stoppen, selecteert u de knop Cancel (Annuleren). Selecteer de knop Retry (Opnieuw proberen) om de controle opnieuw te starten.
Pagina 36
Referentiegids onderzoeksmodus NextSeq 550Dx-instrument OPMERKING Beëindiging van een scan is definitief. Als u de scan beëindigt voordat de scan is voltooid, worden de scangegevens niet opgeslagen. Gegevensoverdracht Als de scan is voltooid, worden gegevens in de wachtrij voor overdracht naar de scanuitvoermap geplaatst.
Pagina 37
Referentiegids onderzoeksmodus NextSeq 550Dx-instrument Documentnr.1000000041922 v03 NLD Uitsluitend bedoeld voor onderzoeksdoeleinden. Niet voor gebruik in diagnostische procedures.
Preventief onderhoud Illumina adviseert elk jaar een preventieve onderhoudsbeurt te laten uitvoeren. Als u geen servicecontract heeft afgesloten kunt u contact opnemen met de accountmanager voor uw regio of met de technische ondersteuning van Illumina om een afspraak te maken voor een preventieve onderhoudsbeurt. Voor een dergelijke onderhoudsbeurt worden kosten in rekening gebracht.
Referentiegids onderzoeksmodus NextSeq 550Dx-instrument Afbeelding 24 Reagenswascartridge en bufferwascartridge originele stijl. Afbeelding 25 Reagenswascartridge en bufferwascartridge nieuwe stijl. Prepareren voor een handmatige wassing na de run Kies voor het voorbereiden van een handmatige wassing na de run zoals hieronder beschreven, of voor het voorbereiden van een snelle wassing (volgende gedeelte).
Referentiegids onderzoeksmodus NextSeq 550Dx-instrument Voeg 1 ml 0,12% NaOCl toe aan de reagenswascartridge. Het juiste reservoir komt overeen met positie nr. 28 van de voorgevulde cartridge. Afbeelding 26 NaOCl laden Combineer de volgende volumes om een wasoplossing van 0,05% Tween 20 te verkrijgen: Bufferwascartridge originele stijl 100% Tween 20 (62 µl) Water van laboratoriumkwaliteit (125 ml)
Raadpleeg voor aanvullende informatie met betrekking tot milieu, gezondheid en veiligheid het veiligheidsinformatieblad op support.illumina.com/sds.html. Schuif de lege bak voor gebruikte reagentia in het buffercompartiment totdat deze niet verder kan.
Referentiegids onderzoeksmodus NextSeq 550Dx-instrument OPMERKING Het luchtfilter werkt niet goed als het achterstevoren zit. Zorg dat u het luchtfilter zo in de bak plaatst dat u de groene pijl omhoog kunt zien en dat u het waarschuwingsetiket niet kunt zien. De pijl moet in de richting van het handvat van de filterbak wijzen.
OPMERKING Als er een firmware-update is inbegrepen, zal het systeem automatisch opnieuw moeten opstarten nadat de firmware is geüpdatet. Handmatige software-update Download de System Suite-installatiemodule van de Illumina-website en sla deze op in een netwerklocatie. U kunt ook het software-installatiebestand kopiëren naar een draagbare USB-schijf.
Verplaats het instrument niet. Het verkeerd verplaatsen van het instrument kan invloed hebben op de optische uitlijning en kan de gegevensintegriteit in gevaar brengen. Als u het instrument moet verplaatsen, moet u contact opnemen met een vertegenwoordiger van Illumina. Documentnr.1000000041922 v03 NLD Uitsluitend bedoeld voor onderzoeksdoeleinden.
Referentiegids onderzoeksmodus NextSeq 550Dx-instrument Afsluiten en naar Windows De opdracht Exit to Windows (Afsluiten en naar Windows) geeft toegang tot het besturingssysteem van het instrument en elke map op de computer van het instrument. Het commando sluit de software veilig af en keert terug naar Windows.
Technische ondersteuning op pagina 69. Probleemoplossingsbestanden Een vertegenwoordiger van de technische ondersteuning van Illumina kan vragen om kopieën van runspecifieke of scanspecifieke bestanden om problemen op te lossen. Doorgaans worden de volgende bestanden gebruikt voor het oplossen van problemen. Probleemoplossingsbestanden voor sequencing-runs...
Selecteer in het scherm run setup (Runinstellingen) Back (Terug) om terug te keren naar de laadstap en stel de runinstellingen opnieuw in. Vereiste software Essentiële componenten van de software ontbreken. Neem contact op met de technische ondersteuning van Illumina. Documentnr.1000000041922 v03 NLD Uitsluitend bedoeld voor onderzoeksdoeleinden. Niet voor gebruik in diagnostische procedures.
Ruimte netwerkschijf De netwerkserver is vol. Temperatuur Aanbevolen actie Temperatuur Neem contact op met de technische ondersteuning van Illumina. Temperatuursensoren Neem contact op met de technische ondersteuning van Illumina. Ventilatoren Neem contact op met de technische ondersteuning van Illumina. Beeldvormingssysteem...
Ruimte netwerkschijf De BaseSpace-account of de netwerkserver is vol. Beeldvormingssysteem Aanbevolen actie Beperkingen in de Neem contact op met de technische ondersteuning van Illumina. beeldvorming Z Steps-and-Settle Neem contact op met de technische ondersteuning van Illumina. Bitfoutpercentage Neem contact op met de technische ondersteuning van Illumina.
Referentiegids onderzoeksmodus NextSeq 550Dx-instrument Omzeilt de automatische wassing na de run. Als u een rehybridisatierun start, voert de software de volgende stappen uit om de run te doen: Creëert een runmap op basis van een unieke runnaam. Controleert dat de rehybridisatiedatum van de stroomcel niet is verlopen. Zet de reagentia klaar.
Referentiegids onderzoeksmodus NextSeq 550Dx-instrument Een nieuwe run prepareren op het tabblad BaseSpace Prep (Voorbereiding BaseSpace) Als het instrument is geconfigureerd voor BaseSpace of BaseSpace Onsite, prepareert u een nieuwe run op het tabblad Prep (Voorbereiding) met dezelfde parameters als de oorspronkelijke run. TIP Klik op het tabblad Pools, selecteer de juiste pool-ID om de instellingen van de vorige run te behouden en wijs vervolgens een unieke naam toe aan de nieuwe run.
Genereert uitvoerbestanden in een nieuwe uitvoermap. Verhoogt de scanteller met 1 afhankelijk van de scantelling bij de laatste herscan. Manifestbestanden en clusterbestanden vervangen Ga naar de ondersteuningspagina van Illumina (support.illumina.com) voor de BeadChip die u gebruikt en klik op het tabblad Downloads.
Wash (Was) – bevat het recept voor handmatig wassen. RAID-foutmelding De NextSeq 550Dx-computer is uitgerust met vier harde schijven, twee voor de diagnostische modus en twee voor de onderzoeksmodus. Als een harde schijf storing krijgt, genereert het systeem een RAID- foutmelding en wordt u verzocht contact op te nemen met de technische ondersteuning van Illumina.
Selecteer een van de volgende opties om een locatie te specificeren waar de gegevens naar worden overgedragen voor de daaropvolgende analyse. Selecteer BaseSpace om de sequentiegegevens naar Illumina BaseSpace te versturen. [Optioneel] Selecteer het selectievakje voor de Output Folder (Uitvoermap), selecteer Browse (Bladeren) en navigeer naar een secundaire netwerklocatie om naast BaseSpace ook BCL-bestanden op te slaan.
Wanneer deze instelling is ingeschakeld, worden instrumentprestatiegegevens naar Illumina verzonden. Met behulp van deze gegevens kan Illumina problemen beter oplossen en mogelijke storingen detecteren voor een proactief onderhoud en maximale gebruiksduur van het instrument. Raadpleeg de Illumina Proactive technische handleiding (documentnr. 1000000052503) voor meer informatie over de voordelen van deze service.
Pagina 56
Referentiegids onderzoeksmodus NextSeq 550Dx-instrument Selecteer een beeldbestandstype voor opgeslagen beelden. Het standaard bestandstype voor beelden is JPG. Selecteer een uitvoerbestandstype voor scangegevens. Het standaard bestandstype voor uitvoer is GTC only (alleen GTC). Selecteer Save (Opslaan). Specificeer vanuit het Scan Map-scherm het volledige pad naar het manifestbestand en clusterbestand voor elk BeadChip-type.
Pagina 57
Referentiegids onderzoeksmodus NextSeq 550Dx-instrument Documentnr.1000000041922 v03 NLD Uitsluitend bedoeld voor onderzoeksdoeleinden. Niet voor gebruik in diagnostische procedures.
Workflow Real-Time Analysis Overzicht Real-Time Analysis Het NextSeq 550Dx-instrument gebruikt een Real-Time Analysis (RTA)-software-implementatie genaamd RTA2. RTA2 wordt uitgevoerd op de instrumentcomputer en extraheert intensiteiten van beelden, voert een basebepaling uit en wijst een kwaliteitsscore toe aan de basebepaling. RTA2 en de besturingssoftware communiceren via een webgebaseerde HTTP-interface en gedeelde geheugenbestanden.
Referentiegids onderzoeksmodus NextSeq 550Dx-instrument Foutafhandeling RTA2 maakt logboekbestanden en schrijft deze naar de RTALogs-map. Fouten worden geregistreerd in een foutenbestand in *.tsv-bestandsindeling. De volgende log- en foutenbestanden worden na afloop van de bewerking naar de definitieve uitvoerbestemming verzonden: *GlobalLog*.tsv bevat een samenvatting van de belangrijke rungebeurtenissen. *LaneNLog*.tsv bevat een lijst van verwerkingsgebeurtenissen voor elke baan.
Basebepaling bepaalt een base (A, C, G of T) voor elk cluster van een bepaalde tegel in een specifieke cyclus. Het NextSeq 550Dx-instrument maakt gebruik van sequencing met 2 kanalen, waardoor slechts 2 beelden nodig zijn om de gegevens voor 4 DNA-basen te coderen, 1 van het rode kanaal en 1 van het groene kanaal.
Referentiegids onderzoeksmodus NextSeq 550Dx-instrument Tabel 1 Basebepalingen in tweekanaalsequencing Base Rood kanaal Groen kanaal Resultaat 1 (aan) 1 (aan) Clusters die intensiteit in zowel het rode als het groene kanaal vertonen. 1 (aan) 0 (uit) Clusters die alleen intensiteit in het rode kanaal vertonen. 0 (uit) 0 (uit) Clusters die geen intensiteit vertonen op een bekende clusterlocatie.
Pagina 62
Referentiegids onderzoeksmodus NextSeq 550Dx-instrument OPMERKING De kwaliteitsscore is gebaseerd op een aangepaste versie van het Phred-algoritme. Voor de kwaliteitsscore wordt voor elke basebepaling een set voorspellers berekend en worden vervolgens de voorspellende waarden gebruikt om de Q-score in een kwaliteitstabel op te zoeken. De kwaliteitstabellen zijn opgesteld om optimaal nauwkeurige kwaliteitsvoorspellingen te doen voor runs die zijn gegenereerd door middel van een specifieke configuratie van sequentiëringplatform en chemieversie.
Pagina 63
Referentiegids onderzoeksmodus NextSeq 550Dx-instrument Documentnr.1000000041922 v03 NLD Uitsluitend bedoeld voor onderzoeksdoeleinden. Niet voor gebruik in diagnostische procedures.
Bijlage C Uitvoerbestanden en -mappen Sequencinguitvoerbestanden Structuur uitvoermap Uitvoerbestanden scannen Structuur van de uitvoermap voor scans Sequencinguitvoerbestanden Bestandstype Bestandsbeschrijving, locatie en naam Basebepalingsbestand Elke geanalyseerde tegel wordt opgenomen in een basebepalingsbestand, samengevoegd in 1 bestand voor elke baan, voor elke cyclus. Het samengevoegde bestand bevat de basebepaling en de gecodeerde kwaliteitsscore voor elke cluster van die baan.
Referentiegids onderzoeksmodus NextSeq 550Dx-instrument Tabel 2 Stroomceltegels Hoge Stroomcelonderdelen Omschrijving uitvoer Banen Een baan is een fysiek kanaal met specifieke in- en uitvoerpoorten. Oppervlakken De stroomcel wordt afgebeeld op 2 oppervlakken, op de boven- en onderkant. De bovenkant van 1 tegel wordt afgebeeld, vervolgens wordt de onderkant van dezelfde tegel afgebeeld alvorens naar de volgende tegel te gaan.
Referentiegids onderzoeksmodus NextSeq 550Dx-instrument Cameranummering Het NextSeq 550Dx-instrument gebruikt 6 camera's om de stroomcel af te beelden. Camera's zijn genummerd van 1 tot 6. De camera's 1 tot 3 maken beelden van baan 1. De camera's 4 tot 6 maken beelden van baan 3. Nadat de banen 1 en 3 zijn afgebeeld, verplaatst de beeldvormingsmodule zich op de X-as om de banen 2 en 4 af te beelden.
Referentiegids onderzoeksmodus NextSeq 550Dx-instrument Structuur uitvoermap De besturingssoftware genereert automatisch de naam voor het uitvoerbestand. Gegevens Intensiteiten BaseCalls L001 – Basebepalingsbestanden voor baan 1, samengevoegd in 1 bestand per cyclus. L002 – Basebepalingsbestanden voor baan 2, samengevoegd in 1 bestand per cyclus. L003 –...
Pagina 68
Referentiegids onderzoeksmodus NextSeq 550Dx-instrument Uitvoerbestanden scannen Bestandstype Bestandsbeschrijving, locatie en naam GTC-bestanden Genotypebepalingsbestand. Er wordt een GTC-bestand gegenereerd voor elk monster dat op de BeadChip wordt gescand. De bestandsnaam bevat de gescande barcode en het gescande monster. [barcode]_[monster].gtc Beeldbestanden De naam die aan beeldbestanden wordt gegeven is afhankelijk van het gebied dat op de BeadChip wordt gescand.
Pagina 69
Referentiegids onderzoeksmodus NextSeq 550Dx-instrument Documentnr.1000000041922 v03 NLD Uitsluitend bedoeld voor onderzoeksdoeleinden. Niet voor gebruik in diagnostische procedures.
Pagina 70
Index clusters die de filter passeren 56 compatibiliteit aan-uitknop 4, 9 RFID-tracking 7 aan-uitschakelaar 9 RFID tracking 5 adapter stroomcel, reagenscartridge 5 BeadChip laden 29 componenten BeadChip oriëntatie 27 beeldvormingscompartiment 3 overzicht 5 buffercompartiment 3 analyse reagenscompartiment 3 uitvoerbestanden 59 statusbalk 3 analyse, primair components...
Zwitserland +41 565800000 +41 800200442 Overige landen +44 1799 534 000 Veiligheidsinformatiebladen (SDS, safety data sheets) — zijn verkrijgbaar op de website van Illumina via support.illumina.com/sds.html. Productdocumentatie – beschikbaar voor downloaden in pdf-vorm via support.illumina.com. Documentnr.1000000041922 v03 NLD Uitsluitend bedoeld voor onderzoeksdoeleinden.
Pagina 75
Referentiegids onderzoeksmodus NextSeq 550Dx-instrument Documentnr.1000000041922 v03 NLD Uitsluitend bedoeld voor onderzoeksdoeleinden. Niet voor gebruik in diagnostische procedures.