7 Probleemoplossing
Probleem
Patroon met dubbele banden
Slechte bandresolutie
Schuimkussens schilferen af
34
Oplossing
Kies een buffer met de juiste ionensterkte en
buffercapaciteit. De buffercapaciteit van TBE
(Tris/boraat/EDTA) is bijvoorbeeld hoger dan die
van TAE (Tris/azijnzuur/EDTA). Als de buffer leeg
raakt, stopt u de run, verwijdert u het deksel en
pipetteert u de buffer van elke kamer in de
tegenoverliggende kamer om de buffer weer aan
te vullen.
Als de gel ongelijk is, zet u de giettray waterpas
voordat u de gel giet.
De kam moet verticaal staan om vervorming van
de well te voorkomen.
Verlaag het bufferniveau tot 1 mm boven de
bovenkant van de gel om de verticale tempera-
tuurgradiënt te verlagen.
Voeg Ficoll™, glycerol of sucrose toe aan de laad-
buffer om ervoor te zorgen dat het monster naar
de bodem van de well zakt.
Zorg ervoor dat het monster compleet is opge-
lost.
Verlaag de spanning.
Verlaag de monsterconcentratie.
Verlaag het monstervolume.
Er is ten minste 1 mm gel onder de bodem van de
kam nodig om te voorkomen dat de monsters uit
de bodem van de well lekken.
Verlaag de zoutconcentratie van het monster.
Controleer de enzymactiviteit; het monster
vereist wellicht een langere enzymafbraak of een
andere restrictiebuffer.
Bereid vers monster als u nucleasebesmetting
vermoedt.
Kies agarose met een lage endosmosewaarde.
Installeer de runtray zoals beschreven in
gieten, op pagina
25, maar druk deze niet recht
naar beneden op zijn plaats.
Mini Submarine Unit Gebruiksaanwijzing 29281780 AB
De gel