Inhoudsopgave
Advertenties
5 Gebruik
5.2 Elektroforese-run
De gelrun uitvoeren
Volg de onderstaande instructies om de agarosegel uit te voeren.
Opmerking:
Tip:
Stap
1
2
3
4
5
6
28
LET OP
Bij de maximuminstelling begint de unit oververhit te raken zodra
de gekoelde basis de omgevingstemperatuur bereikt. Als overver-
hitting niet onder controle wordt gehouden, zal de gel smelten
en/of de basis van de unit kromtrekken!
Koel de basis voor gebruik, met name als er hogere spanningsin-
stellingen worden gebruikt of wanneer de scheiding langer dan
30 minuten vergt.
Om de voortgang van de scheiding te bewaken, kunt u nu 0,5
μg/mL (eindconcentratie) ethidiumbromide toevoegen aan de
runbuffer of 50 μg/mL (eindconcentratie) ethidiumbromide aan
de monsterbuffer. Om de voortgang te bekijken, schakelt u de
stroomvoorziening uit, verwijdert u het deksel en een houdt u
een draagbare UV-lamp bij de gel. Door ethidiumbromide toe te
voegen aan de runbuffer of monsterbuffer wordt de migratie
enigszins vertraagd. Detectie met deze methode is niet zo
gevoelig als kleuring en weergave op een transilluminator.
Actie
Vul beide bufferkamers met runbuffer totdat de buffer ongeveer 1 mm op de
gel ligt. Dit vereist ongeveer 220 mL buffer.
Voeg monster toe tot 5× laadbuffer en meng. Zorg ervoor dat 1/5 van het
uiteindelijke volume bestaat uit laadbuffer.
Gebruik een micropipet voor het laden van elk monster en vermijd daarbij
het doorprikken van de bodem van de well of het insluiten van luchtbellen.
Tip:
Als er geen kleurstof is toegevoegd aan de koelvloeistof, plaatst u de basis op
een donkere achtergrond om de wells beter te kunnen zien.
Plaats het deksel met de zwarte draad van de kathode (-) op het uiteinde dat
zich het dichtst bij de monster-well bevindt. Nucleïnezuurmonsters
migreren naar de rode draad van de anode (+).
Sluit de kleurgecodeerde snoeren (rood op rood en zwart op zwart) aan op
een goedgekeurde voedingsbron.
Stel het spanningsniveau en de timer (indien beschikbaar) in naar gelang van
de mate van gevraagde resolutie.
Mini Submarine Unit Gebruiksaanwijzing 29281780 AB
Advertenties
Hoofdstukken
Inhoudsopgave
