Inhoudsopgave
Advertenties
7 Probleemoplossing
7.1 Probleemoplossing bij elektroforese
Probleem
Eiwit maakt verticale
strepen
Banden zijn scheef of
vervormd
Gekleurd monster
verzamelt zich aan
de voorzijde van de
buffer
Gekleurd monster
verzamelt zich aan
de bovenkant van de
gel wanneer de voor-
kant van de buffer de
bodem heeft bereikt
Gekleurd monster
verzamelt zich op
zowel de boven- als
de onderkant van de
gel
52
Mogelijke oorzaak
Deeltjes in monster
Onvolledige gelvoor-
bereiding en polyme-
risatie
Onregelmatige inter-
face tussen stapel-
en runninggels
Voorbereiding van
monster
Gelconcentratie
Gelconcentratie
Neerslag
Gelconcentratie
Oplossing
Centrifugeer of filter het monster
vóór het laden om deeltjes te
verwijderen.
Dialyseer of ontzout het monster.
Ontgas de stapelgeloplossing en
voorkom insluiting van lucht-
bellen onder de tanden van de
kam.
Bedek de runninggel met met
water verzadigde butanol vóór
het begin van de polymerisatie,
om de vorming van een ongelijk-
matig geloppervlak te voor-
komen.
Dialyseer of ontzout het monster.
Centrifugeer of filter het monster
vóór het laden om deeltjes te
verwijderen.
Moleculen worden niet voldoende
ingeperkt door de poriegrootte
van de scheidingsgel: verhoog het
acrylamidepercentage van de gel.
De poriegrootte van de gel is te
klein: verlaag het acrylamideper-
centage van de scheidings- (of
stapel-) gel.
Het eiwit is neergeslagen.
Verwarm het monster bij een
lagere temperatuur (70 °C of
minder) gedurende 1 tot 2
minuten.
Het bereik van het molecuulge-
wicht van het monster vereist dat
een acrylamideconcentratiegra-
diënt het volledige bereik van
eiwitgrootten scheidt.
miniVE Gebruiksaanwijzing 29281778 AB
Advertenties
Hoofdstukken
Inhoudsopgave
Probleemoplossen
