Download Inhoudsopgave Inhoud Print deze pagina

Aangepaste S.u.b. Voor Microdrager - Thermo Fisher Scientific HyPerforma 5:1 Gebruikershandleiding

Inhoudsopgave

Advertenties

Bijlage E
|
Aangepaste toepassingen voor de HyPerforma S.U.B.
Thermo Scientific

Aangepaste S.U.B. voor microdrager

Adherente celculturen zijn wel aangetoond in standaard S.U.B.'s met
microdragers, maar ze worden veel minder gebruikt dan hun tegenhangers
met suspensie. Uitgebreide toepassingen vereisen adherente celculturen en
een verschuiving van traditionele systemen naar systemen voor eenmalig
gebruik zijn de impuls om de S.U.B. rechtstreeks aan te passen voor
toepassingen met microdragerculturen. De flexibiliteit van S.U.B.'s en het
feit dat alle bewegende aandrijvingsdelen zich buiten de cultuurvloeistof
bevinden hebben geleid tot succesvolle microdragerculturen waar deeltjes
of beads geen gevaar lopen. Zoals in de vorige gevallen gebruikten de
aanpassingen de bibliotheek van standaardonderdelen of licht gewijzigde
delen voor eenvoudige aanpassingen aan HyPerforma S.U.B.'s met
een volume van 50 tot 500 l. Werken boven dit volume is wel mogelijk,
maar dergelijke aanpassingen moeten worden geëvalueerd volgens het
specifieke geval om optimale prestaties te garanderen.
Aangepast mengen
In culturen op basis van microdragers vormt de afzetting van adherente
cellen op beads op de bodem van de vat een belangrijk probleem. Cellen
in dergelijke staat zullen hypoxie en dramatische pH-afwijkingen van de
bulkcultuur ondergaan. De invoer van een grotere mengschroef zal meer
ingangsvermogen leveren per rotatie, zoals hierboven toegelicht. Zo kunnen
de operationele draaisnelheden in het algemeen worden verlaagd, terwijl de
omlaag pompende mengschroef voldoende optilt en veegt over de bodem
om te vermijden dat deeltjes zich afzetten. Deze lagere bedrijfssnelheid is
cruciaal om de afschuifsnelheden van de mengschroef laag te houden en
om de aan de schroef verbonden Kolmogorov-lengtes boven 1/2–2/3 van
de diameter van de microdragerdeeltjes te houden (zie onderstaande
vergelijking 2). Omdat op die manier kleine wervellengtes worden vermeden
en tipsnelheden van de mengschroef worden verlaagd (vergelijking 3), zijn
de cellen minder geneigd om van de microdragers gerukt te worden.
In de bovenstaande vergelijkingen is
kinematische viscositeit van de vloeistof,
vermogensnummer van de mengschroef,
N
de snelheid van de mengschroef en
i
De effecten van deze wijzigingen aan de mengschroef zijn te zien in
grafieken E.2 en E.3, waar de Kolmogorov-lengtes en tipsnelheden
worden getoond ten opzichte van het ingangsvermogen. Bij equivalente
Kolmogorov-lengte kunnen een hoger vermogen en lagere tipsnelheid
worden bereikt wanneer een grotere mengschroef wordt gebruikt.
Gebruikershandleiding HyPerforma 5:1-bioreactor voor eenmalig gebruik
λ
de Kolmogorov-lengte,
ρ
de vloeistofdichtheid,
D
de diameter van de mengschroef,
i
u
de tipsnelheid van de mengschroef.
tip
µ
de
N
het
P
|
193

Advertenties

Inhoudsopgave
loading

Inhoudsopgave