Bijlage E
|
Aangepaste toepassingen voor de HyPerforma S.U.B.
Thermo Scientific
De uitdaging van het vergroten van de mengschroef is dat interferentie
van de schroef met de S.U.B. BPC en hardware vermeden moet
worden, met voldoende mengcapaciteit en een hogere capaciteit
van de massaoverdracht. Het werd vastgesteld dat met standaard 2:1
aandrijfassen en een motorhardware van 16,5° de mengschroef boven
het spoelsysteem werd gepositioneerd, op voldoende afstand van de
BPC-wand om schade te voorkomen.
Aangepast spoelen
Een aanzienlijke verhoging van de massaoverdracht werd niet enkel
verkregen door meer te roeren, maar ook door het spoelsysteem in de
S.U.B. aan te passen. De bellen werden verkleind door de DHS-poriegrootte
in alle S.U.B.'s te verlagen, waardoor het oppervlak van de massaoverdracht
effectief toenam. Tegelijk werd het aantal DHS-poriën vergroot om
het gasstroomgebied te maximaliseren, wat debieten tot 0,1–0,2 vvm
mogelijk maakte met gasingangssnelheden van ten hoogste 23 m/s.
Hoewel fritspoelsystemen kunnen worden opgenomen in de
perfusieprocessen, heeft de ervaring getoond dat hoge celdichtheden
en proteïneconcentraties in deze processen vaak leiden tot verontreiniging
van het fritoppervlak. De ophoping van dit celmateriaal kan leiden tot
grote afwijkingen in de massaoverdracht en uiteindelijk zelfs tot een bijna
volledig verlies van prestaties. Een lichte verontreiniging van de DHS-poriën
kan plaatsvinden, maar er is geen effectief verlies in massaoverdracht
waargenomen. Om die reden wordt het aanbevolen om de DHS te
gebruiken in alle perfusietoepassingen.
BPC-wijzigingen voor perfusie
Om perfusie op alle schalen in te voeren, zijn poorten voor alternerende
kruisstroom (ATF) of kruisstroomfiltratie (TFF) opgenomen in de
standaardtekeningen. ATF-verbindingen hebben doorgaans één of twee
grote poorten van 1 inch en een lengte van dikwandige C-Flex-slang,
eindigend in een CPC AseptiQuik X steriele connector van 1 inch. Dit maakt
een eenvoudige en betrouwbare verbinding met een ATF6- of ATF10-filter
mogelijk. Voor TFF-verbindingen wordt de maat van de poorten en buizen
afgestemd op de grootte van het vat, met minimale lengte van de buizen
en ophopingsvolume. Deze verbindingen eindigen in CPC AseptiQuik G
connectoren in standaardtekeningen. Zoals bij de meeste onderdelen in
standaardtekeningen kunnen ze worden gewijzigd volgens de behoeften
van de klant.
Ook inbegrepen als manier om richtwaarden van celdichtheden te bereiken
tijdens de perfusieprocessen is een specifieke aftappoort om cellen uit de
cultuur te trekken. Vaak worden deze aftappingen van de reactor uitgevoerd
wanneer cellen voorbij richtwaarden voor celdichtheden groeien; ze kunnen
worden gecontroleerd via celdichtheidssensoren of wiskundige bepaling
van aftapsnelheden op basis van richtwaarden voor celdichtheden en
celgroeisnelheden.
Gebruikershandleiding HyPerforma 5:1-bioreactor voor eenmalig gebruik
|
190