Inhoudsopgave
Advertenties
1.1
Toepassing
Het BD Viper™ LT-systeem, dat in combinatie met geschikte IVD-assays (in-vitro diagnostisch) wordt
gebruikt, is bedoeld voor de automatische extractie van nucleïnezuren uit meerdere monstertypen en
voor de amplificatie en detectie van doelnucleïnezuursequenties door middel van Strand Displacement
Amplification (SDA)- of Polymerase Chain Reaction (PCR)-technologieën.
1.2
Overzicht
Het BD Viper™ LT-systeem gebruikt de homogene Strand Displacement Amplification (SDA)-
technologie of de Polymerase Chain Reaction (PCR)-technologie als de amplificatiemethode en de
fluorescerende energieoverdracht (ET) als de detectiemethode om te testen op de aanwezigheid van
pathogenen door hun genetische inhoud in klinische monsters.
Voor zowel SDA- als PCR-assays worden de monsters ingelogd en ondergaan ze een
voorverwarmingsstap in de BD Pre-warm Heater. Bij SDA-assays wordt er voorverwarmd om het slijm
op te lossen en het monster te homogeniseren; bij PCR-tests wordt er voorverwarmd om de cellen te
lyseren en het DNA vrij te geven. Nadat de monsters zijn afgekoeld, worden die in het BD Viper™ LT-
instrument geladen. Het voorverwarmde monster wordt overgebracht naar een extractiebuisje dat
ijzeroxide-deeltjes bevat in een oplosbare film. Bij SDA-assays wordt een hoge pH-waarde gebruikt
om de bacteriecellen te lyseren en het DNA ervan in een oplossing te vormen. Vervolgens wordt er
zuur toegevoegd om het pH te verlagen en een positieve lading te veroorzaken op het ijzeroxide dat
zich op zijn beurt bindt aan het negatief geladen DNA. De deeltjes en het gebonden DNA worden
vervolgens door magneten naar de zijkanten van het extractiebuisje getrokken en het ongebonden
materiaal wordt opgezogen naar het afval. De deeltjes worden gewassen en er wordt een hoge
pH-elutiebuffer toegevoegd om het gezuiverde DNA terug te winnen. Tot slot wordt een neutralisatiebuffer
gebruikt om het pH van de geëxtraheerde oplossing naar een optimale conditie te brengen voor
amplificatie van het doel.
Het BD Viper™ LT-instrument brengt geëxtraheerde monsters en positieve en negatieve assay-
controles over op schalen die SDA- primingmicrowells of PCR-buisjes bevatten. Bij SDA-assays zorgt
een opwarmingsstap in elke prime-microwell voor een specifieke hybridisatie van SDA-primers voor
het doel (indien aanwezig), waarna het reactiemengsel wordt overgebracht naar een overeenkomstige
grijze SDA-amplificatiemicrowell. Zowel de SDA- als PCR-schalen worden afgedicht met een
schaalafdichter. Zodra de schaal is verzegeld, sluit de klep van het afleesapparaat over de schaal. De
volgende amplificatie en detectie doen zich voor. De resultaten worden automatisch gerapporteerd op
basis van het algoritme dat in de assay-specifieke bijsluiter(s) voor reagentia staat aangegeven.
1 - Inleiding
OPMERKING
De weergegeven software- en firmwareversies zijn
mogelijk niet de meest recent uitgebrachte versies. Zie
de releaseopmerkingen van de klant voor nauwkeurige
informatie over nieuw uitgegeven versies.
7
Advertenties
Inhoudsopgave
