5 Gebruik
5.1 Intelligent Packing van de kolom bij ÄKTAprocess en ÄKTApilot
2 Verwijder snel de deksel van de container en giet de inhoud in een meetcilinder. Laat
3 Voor het pakking vervangt u de opslagvloeistof door een geschikte pakkingvloeistof.
Slurryvolume
De methodewizard berekent en presenteert het benodigde slurryvolume op de samen-
vattende wizardpagina aan de hand van de volgende formule;
waar de Slurry-volumefactor (SVF) een compensatiefactor is voor het verschil tussen
een door zwaartekracht gesedimenteerde bedhoogte en een geconsolideerde bedhoogte,
en PF de Pakkingfactor is, (zie Definities in verband met de Pakking Factor, op pagina 18).
De SVF is geldig voor slurryconcentratiemetingen uitgevoerd met medium in 20% ethanol
en pakkingbedden die zijn gepakt met de pakkingvloeistof die is voorgesteld op de sa-
menvattende wizardpagina. Als de gebruikte pakkingvloeistof anders is dan de op de
samenvattende wizardpagina voorgestelde pakkingvloeistof, of als er een aangepaste
mediumkeuze wordt gemaakt, moet de SVF door de gebruiker worden berekend. Dit
kunt u doen aan de hand van herhaaldelijke vergelijkingen van het door zwaartekracht
gesedimenteerde pakkingbed in een cilinder met de bereikte pakkingbedhoogte in de
pakkingvloeistof van uw keuze.
Opmerking:
68
het medium sedimenteren ('s nachts voor een juiste druppelgrootte van 90 µm, en
48 uur voor < 50 µm) zodat u de volumeverhouding van gesedimenteerd medium
bereikt. De cilinder moet op een vlakke ondergrond worden geplaatst, afgedekt met
bijvoorbeeld Parafilm, om het verdampen te minimaliseren.
Opmerking:
Sommige media hebben meer dan 48 uur nodig om volledig te sedi-
menteren.
Zodra het gesedimenteerde bedvolume is verkregen, kan het juiste slurryvolume
worden berekend op basis van de slurryconcentratie. De slurryconcentratie in nieuwe
containers met medium is ongeveer 70% (v/v).
Bijvoorbeeld:
a Decanteer de opslagvloeistof uit de bovenkant van het gesedimenteerde medium,
voeg nieuwe vloeistof toe en meng voorzichtig. Herhaal de decanteerstap een
aantal keren, of;
b Pak de kolom met medium, was met verscheidene kolomvolumes van geschikte
vloeistof en pak de kolom opnieuw, of;
c
Filter kleinere volumes medium met behulp van een vacuümfiltratiesysteem met
een glazen filtreertrechter.
Beoogde bedhoogte x PF x Kolomdoorsnede-oppervlakte x SVF
Slurryvolume =
Alle S- en SP-ligandmedia worden verzonden en geleverd 0,2 M natriumace-
taat en 20% ethanol. Elke gedecanteerde oplossing zal zout bevatten.
Slurryconcentratie
AxiChrom 140- en 200-kolommen Bedieningsinstructies 28-9431-23 AG