Hoofdstuk 3: Inleiding tot Absorbantiemonitoring
3.1 Werkingstheorie
Absorbantie meet hoeveel van het invallend licht wordt geabsorbeerd wanneer het door een materiaal
gaat. De intensiteit van het licht neemt exponentieel af met de afstand naarmate het licht door het
materiaal gaat. De transmissie kan dus bepaald worden door de intensiteit van zowel het invallende als
het doorgelaten licht te meten. De waarde van de transmissie kan dan gebruikt worden om de
absorbantie van het staal te berekenen.
De Wet van Lambert-Beer geeft aan hoe absorbantie verband houdt met de concentratie en de afstand
die het licht moet afleggen om doorheen het staal te gaan (weglengte):
Hierbij is A de absorbantie, ε de extinctiecoëfficiënt, c de concentratie van de oplossing (in mol/L), en l is
de weglengte die het licht heeft afgelegd doorheen het staal (in cm).
3.2 Absorbantie op basis van LED's
Fotometers op basis van Light emitting diode (LED) zijn een goede keuze als er kwalitatieve metingen
gewenst zijn. Daarnaast, via het gebruik van kalibratienormen en omgevingscontrole, is een fotometer op
basis van LED geschikt voor een kwantitatieve bepaling van het analytconcentraat. Bij kwantitatieve
metingen, is het van cruciaal beland dat de fotometer op basis van LED nauwkeurig gecorreleerd is met
standaard laboratoriummethodes en -oplossingen.
De LED levert een specifieke golflengtebereik voor metingen, gekozen om samen te vallen met
analytspecifieke moleculaire absorbantie. De LED bevindt zich in de fotometer en is specifiek voor de
toepassing. Daarom is de UV-VIS-NIR fotometer een speciaal instrument voor het monitoren van slechts
één of twee specifieke analyten van belang.
Hieronder zijn twee voorbeelden van LED spectrum profielgrafieken, voor typische LED lichtbron
golflengtes 260 en 280 nm (Figuren 1 en 2).
Definities
•
CWL (Center Wavelength [Centrale Golflengte]): De golflengte van een optische bron die als het
midden ervan beschouwd wordt. De golflengte van de piek van de spectrale dichtheidskromme.
o Belangrijk: Als metingen worden geprobeerd op de schouder/helling van het
absorptieprofiel van de molecule, kan de absorptiemeting drastisch wijzigen over de
spanwijdte van enkele nanometer. Absorbantie kan nooit verzadigd raken omdat een
deel van de output van de LED zich buiten het absorptieprofiel van de molecule bevindt.
Minieme absorptievariaties bestaan in fotometer unit-to-unit wegens de CWL-tolerantie.
PendoTECH UV-VIS-NIR Fotometer Gebruikersgids
A= εcl
Revisie 2
Pagina 13 van 25