Karakteristiek eiwit recovery, Centriprep® 30K apparaat
Concentratie
100 µg/ml
1.000 µg/ml
15 ml startvolume, 25 °C, bucket rotor, 1.500 × g
Runderserumalbumine, twee draaiingen van 25 minuten
Ontzouten
Voor ontzouten of uitwisselen van oplosmiddel, wordt het monster geconcentreerd totdat het
equilibratiepunt wordt bereikt. Filtraat wordt weggegooid, vervolgens wordt het monster teruggebracht
tot het oorspronkelijke volume door een passend oplosmiddel en vortexmengsel toe te voegen. Het monster
wordt vervolgens geconcentreerd en nogmaals gereconstitueerd. Dit proces wordt herhaald totdat de
concentratie van de vervuilende micro opgeloste stof voldoende is verkleind.
Het volgende theoretische voorbeeld illustreert het proces van het ontzouten van een monster:
Stap in het proces:
Oorspronkelijk monster
Draai om te concentreren.
Terugbrengen naar 15 ml
met 10 mM NaCl
Draai om te concentreren/
ontzouten #1
Terugbrengen naar 15 ml
met 10 mM NaCl
Draai om te concentreren/
ontzouten #2
Terugbrengen naar 15 ml
met 10 mM NaCl
Draai om te concentreren/
ontzouten #3
8
% concentraat ± 1 SD
Monstervolume
15 ml
3 ml
15 ml
3 ml
15 ml
3 ml
15 ml
3 ml
Centriprep® 10K en 30K Centrifuge filters units
98,2 ± 1,7
96,6 ± 0,2
Eiwitconcentratie
1 mg/ml
5 mg/ml
1 mg/ml
5 mg/ml
1 mg/ml
5 mg/ml
1 mg/ml
5 mg/ml
NaCl-concentratie
500 mM
500 mM
108 mM
108 mM
29,6 mM
29,6 mM
13,9 mM
13,9 mM