Inhoudsopgave
Advertenties
GEBRUIKSAANWIJZINGEN
EEN GEL GIETEN
1. Plaats de gelbak in het gietplateau. Plaats deze op een vlakke ondergrond
om een gelijkmatige dikte van de gel te garanderen.
2. Bepaal het te maken percentage gel:
Grootte van te
scheiden DNA
600bp tot 12kb
500bp tot 10kb
400bp tot 7kb
200 bp tot 5kb
60bp tot 2kb
* Waarschuwing: blueGelTM is ontworpen om het beste te werken met 0.5 tot 1.0X TBE (Tris Borate EDTA)
buffer. Het gebruik van andere buffers zoals TAE of SB kan leiden tot verminderde prestaties.
3.
Weeg de gewenste hoeveelheid agarose af volgens bovenstaande grafiek en voeg deze toe
aan een kolf van 100 ml (of groter) met 20 ml elektroforesebuffer van 1x TBE. Meng goed door
te draaien.
Tip: Als er meer dan één gel wordt gegoten, kunnen agarose en
bufferhoeveelheden worden vermenigvuldigd met het aantal te
gieten gels. Verhoog de opwarmtijd met ~15 sec per extra gel en
gebruik een grotere kolf.
4.
Plaats de kolf in de magnetron (~30 seconden) of op een hete plaat totdat alle agarose
is opgelost. De agarose/buffermix is klaar als er geen agarosedeeltjes zichtbaar zijn bij het
ronddraaien.
LET OP: de vloeistof kan over de mond van de kolf borrelen en
brandwonden veroorzaken. Wees voorzichtig met het gebruik van
beschermingsmiddelen.
5.
Laat agarose/buffermix gedurende ~2-3 minuten afkoelen en voeg 2 µl Gel GreenTM
DNA-vlek 10.000X voorraad toe (1 µl per 10 ml TBE). Goed draaien om te mengen. Zie
bijlage B voor extra DNA-kleurstoffen die werken met blueGelTM.
Gelpercentage
(%)
0.8
1
1.5
2
3
Opmerking: bij gebruik van twee rijen putten (twee kammen)
zal de resolutie worden verminderd door een kortere
scheidingsafstand.
Agarose
1x TBE*
(g)
(ml)
0.16
20
0.2
20
0.3
20
0.4
20
0.6
20
Advertenties
Inhoudsopgave
